Campi di Applicazione Cromatografica su Strato Sottile (TLC):
La
cromatografia su strato sottile ha un ampio campo di applicazioni che
include prodotti farmaceutici, alimentari, cosmetici e fitochimici.
Fitochimica
Identificazione dei composti nelle medicine tradizionali
Le medicine tradizionali a base di piante ed estratti vegetali sono ampiamente utilizzate in diversi paesi.
Tuttavia, i componenti attivi di molti di questi medicinali sono sconosciuti.
In questi casi, è possibile eseguire la cromatografia su strato sottile su campioni vegetali per separare i componenti.
Piante diverse possono produrre metaboliti diversi in base alla posizione e ad altre condizioni.
Pertanto,
la cromatografia su strato sottile può anche essere utilizzata per
differenziare lo stato metabolico di una pianta in base alla sua
posizione e alle condizioni circostanti.
Attività biologiche dei composti vegetali
La cromatografia su strato sottile può essere utilizzata anche per
identificare la natura di diversi composti vegetali: antiossidanti,
antibatterici o antimicotici.
Per
testare la presenza di antiossidanti, la piastra TLC può essere
spruzzata con 2,2-difenil-picrylidrazyl (DPPH) e metanolo. Questo
composto, contenente radicali liberi, è di colore viola intenso.
Tuttavia, dopo la reazione con gli antiossidanti, vira al giallo,
identificando la presenza di antiossidanti. Per testare la presenza di
composti antibatterici o antimicotici, la piastra TLC può essere
incubata con microrganismi.
La piastra può essere successivamente osservata per la crescita inibita di microrganismi.
Confronto dei metaboliti
Geni
specifici delle piante sono spesso geneticamente modificati, portando
alla produzione di diversi metaboliti. TLC può essere utilizzato per
confrontare i metaboliti nelle piante autoctone e modificate.
Purezza di un campione
La TLC può essere utilizzata per verificare la purezza di un campione
in cui l'analisi di un composto può essere eseguita insieme a un
riferimento autentico.
La presenza di un'impurità può essere rilevata dalla presenza di punti extra sulla lastra.
Analisi biochimica
La TLC viene spesso utilizzata per isolare, confrontare e
caratterizzare i composti e i metaboliti dal sangue, dal siero, dai
fluidi corporei e dalle urine.
Industria alimentare e cosmetica
Le
TLC possono essere utilizzate per separare, identificare e
caratterizzare diversi componenti, colori, prodotti cosmetici e agenti
edulcoranti e conservanti, tra gli altri.
È più facile da eseguire in quanto non richiede apparecchiature sofisticate ed è anche efficiente in termini di tempo.
Studi di stabilità
Gli
studi di stabilità sono richiesti dalla somministrazione di farmaci in
cui è necessario testare la stabilità dei farmaci immagazzinati.
Le
TLC possono essere particolarmente utili in tali test, poiché è
possibile eseguire contemporaneamente più spot per confrontare e
contrastare.
I
risultati possono anche essere facilmente visualizzati e le macchie che
non si muovono o qualsiasi cambiamento nel numero di macchie può
indicare cambiamenti nella natura chimica e nella stabilità di un
farmaco.
Identificazione dei farmaci nei fluidi corporei
Le
TLC possono essere utilizzate negli studi forensi in cui i fluidi
corporei, come l'urina e il sangue, possono essere testati per la
presenza di droghe.
I
farmaci acidi e neutri possono essere identificati utilizzando la silice
ottadecile nella fase stazionaria, mentre la silice semplice e la
silice ottadecile possono essere utilizzate per identificare i farmaci
di base.
Identificazione dei residui di droga negli alimenti
Le
TLC possono essere utilizzate per identificare la presenza di residui
di farmaci e antibiotici negli alimenti, come pollame, manzo, maiale,
latte, pesce, tra gli altri.
Profilo metabolico dei farmaci
Diversi metaboliti presenti in un farmaco possono essere separati mediante TLC.
Monitoraggio della purezza dei farmaci
La
TLC è stata utilizzata per monitorare quantitativamente la purezza di
diversi farmaci, inclusi sedativi, antistaminici, analgesici,
tranquillanti e steroidi.
Esame delle miscele di reazione
TLC
può essere utilizzato per studiare se una reazione è completa.
All'inizio di una reazione, l'intero spot è occupato dal materiale di
partenza. Nel corso della reazione, lo spot del materiale di partenza
continua a ridursi, mentre lo spot dei prodotti continua ad aumentare.
Al
termine della reazione, la macchia del materiale di partenza è
completamente sparita e sulla piastra è visibile solo una macchia del
prodotto.
Pertanto, la completa assenza del punto di partenza può essere utilizzata per contrassegnare la fine di una reazione.
Paolo Pelini Professione Erbochimico
Esperto Valutazione Farmacognostica e Citotossicologica Estratti Vegetali di Piante Officinali
http://www.paolopelinierbochimico.it
